Американские ученые из штата Мичиган полагают, что в качестве главной причины отравления вод Мирового океана ртутью являются бактерии.
Американским ученым удалось выяснить, как лягушкам удается продолжать жить даже после глубокой заморозки.
Биологи уже давно считают, что продолжительность жизни животного определяется очень просто: чем оно больше, тем дольше живет.
Образец РНК подвергали гидролизу ДНКазой I для очистки от остатков ДНК в присутствии 1-кратного буфера для ДНКазы I. Реакционную смесь инкубировали при 37 ºС в течение 1 ч. РНК осаждали из реакционной смеси избытком этанола в присутствии ацетата натрия. Осадок растворяли воде. Измеряли оптическую плотность очищенной РНК.
Готовили водный раствор смеси РНК и «гексапраймера» и инкубировали его в течение 3 мин при 70 ºС, затем 1,5 мин во льду. После этого к смеси добавляли остальные компоненты (буфер для ОТ, dNTP, DTT, ревертаза MuMLV). Концентрации компонентов в РС приведены в табл. 4.
Таблица 4. Состав РС для ОТ.
|
Компонент |
Концентрация или количество в РС |
|
Буфер для ОТ |
1 х |
|
dNTP |
1 мМ |
|
DTT |
5 мМ |
|
«Гексапраймер» |
25 мкМ |
|
MuML-V |
40 е.а. |
|
РНК |
2 мкг |
РС инкубировали 10 минут при комнатной температуре, затем 1 час при 42 ºС, затем, для гидролиза остатков РНК, 10 минут при 70 ºС. Качество полученной кДНК оценивали методом ПЦР с использованием специфических пар праймеров.
Смотрите также
Почвенные клещи
Введение
Клещи
представляют огромное собрание мелких арахнид, очень различных по строению и
образу жизни и в большинстве сильно изменившихся по сравнению с другими.
До
недавнего в ...
Методика и правила голодания
ВВЕДЕНИЕ
Современный
человек привык к постоянному регулярному приему пищи - внешнему питанию. Но питание
может быть еще и внутренним, происходит оно во время голодания.
С
го ...
Эндоэкология. Прикладное значение эндоэкологии
Введение
Человек - это неотъемлемая часть природы. Неразрывными
нитями мы связаны с окружающим нас миром. Это и воздух, которым мы дышим, это и
вода, что мы пьем, это и пища, которую ...